30/03/2026
Le test (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) est une technique de laboratoire utilisée pour détecter et quantifier des protéines, des anticorps ou des hormones dans un échantillon.
Voici les étapes générales pour un ELISA indirect (le plus commun pour détecter des anticorps) :
1. Le (Coating)
On tapisse le fond des puits d'une plaque de microtitration avec l'antigène spécifique de la cible que l'on recherche. L'antigène se fixe aux parois par adsorption hydrophobe.
Action : Incubation (souvent toute une nuit) suivie d'un lavage.
2. Le (Blocking)
Pour éviter que d'autres protéines non spécifiques ne se fixent sur les zones vides du puits, on ajoute une solution de protéines non réactives (souvent de l'albumine de sérum bovin ou de la caséine).
Objectif : Réduire le "bruit de fond" et éviter les faux positifs.
3. de l' (Anticorps Primaire)
On ajoute l'échantillon à tester (sérum, plasma, etc.). Si les anticorps recherchés sont présents, ils se lient spécifiquement à l'antigène fixé au fond du puits.
Lavage : Étape cruciale pour éliminer tout ce qui ne s'est pas lié.
4. de l' Secondaire (Conjugué)
On introduit un deuxième anticorps qui reconnaît la partie constante de l'anticorps humain. Cet anticorps secondaire est couplé à une enzyme (souvent la peroxydase de raifort ou HRP).
Action : Incubation suivie d'un lavage rigoureux.
5. (Substrat Chromogène)
On ajoute un substrat incolore que l'enzyme peut transformer. En réagissant avec l'enzyme, le substrat change de couleur (souvent vers le bleu ou le jaune).
Interprétation : Plus la couleur est intense, plus la concentration de la cible est élevée.
6. des Résultats
On ajoute souvent une solution d'arrêt (acide fort) pour stopper la réaction enzymatique. La plaque est ensuite lue à l'aide d'un spectrophotomètre (lecteur de plaques) à une longueur d'onde précise.
Infoline : +22371494575
